??產品基礎信息
- 貨號:78BEA10011
- 中文名:熱不穩定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)
- 品牌:BIOHUB
- 規格:25 kU
- 儲存條件:-20℃避光保存,有效期3年
- 適用領域:病毒載體生產、蛋白純化、mNGS樣本處理等
??詳細介紹
1?? 產品特性
HL-SAN是一種重組非特異性內切酶,由畢赤酵母表達系統生產 。其核心特性包括:
- 高鹽耐受性:在0.5 M NaCl條件下活性最佳,可耐受高達1 M NaCl 。
- 快速滅活:通過添加DTT或TCEP(還原劑)即可不可逆失活,50℃孵育30分鐘滅活率>99% 。
- 廣譜活性:可降解單鏈/雙鏈DNA及RNA,產物為5-7 nt寡核苷酸 。
2?? 技術參數
- 比活度:≥175,000 Units/mg(基于小牛胸腺DNA標準) 。
- 酶活定義:37℃下30分鐘消化50 μg/ml DNA(OD260增加1.0) 。
- pH范圍:7.5-9.5(最佳pH 9.0) 。
- Mg2?需求:1-20 mM(最佳濃度5-20 mM) 。
3?? 應用場景
- 病毒載體生產:AAV/rAAV載體純化中去除宿主DNA,符合FDA<10ng/dose標準 。
- mNGS樣本處理:快速裂解宿主細胞,提升病原微生物檢出靈敏度(如下呼吸道感染檢測) 。
- 蛋白純化:清除DNA結合蛋白雜質,優化下游工藝 。
??核心優勢
? 高鹽環境下的優秀性能
- 常規核酸酶(如Benzonase)在>100 mM鹽濃度時失活,而HL-SAN在0.5 M NaCl下活性達峰值,顯著提升復雜體系(如AAV裂解液)的核酸去除效率 。
? 智能滅活設計
- 通過添加DTT(1-5 mM)或TCEP(1-10 mM)即可滅活,無需加熱或超濾,簡化工藝流程 。
? 合規性與安全性
- 支持GMP生產,提供完整的COA、MSDS及可追溯文件 。
- 不含Triton X-100,符合歐盟環保法規 。
? 高性價比
- 比活度達175,000 U/mg,單位成本低于同類產品30% 。
?常見問題與解答
- Q1:HL - SAN 與普通核酸酶有何區別?
A1: HL - SAN 專為高鹽設計,在高鹽濃度下仍能保持高效活性,而普通核酸酶在高鹽環境下活性會大幅下降,無法滿足高鹽條件下去除宿主 DNA 等需求。
- Q2:滅活后是否殘留酶活性?
A2: 添加 10mM DTT 或 TCEP 后,5 分鐘內即可實現不可逆滅活,無殘留風險,這樣就能避免殘留酶對后續實驗或生產流程造成干擾。
- Q3:是否支持凍干工藝?
A3: HL - SAN 可凍干保存,復溶后活性穩定,適合長期儲存,這大大提高了產品的便利性和使用壽命,滿足不同的使用和保存需求。
- Q4:推薦使用濃度是多少?
A4: 宿主 DNA 清除推薦 1000U/ml,不過具體的使用濃度還需根據樣本類型進行適當調整,以達到最佳的實驗效果。
- Q5:是否適用于哺乳動物細胞樣本?
A5: 是的,可高效去除哺乳動物基因組 DNA,適用于 mNGS 和病原檢測,適用范圍廣泛,能滿足多種實驗和檢測需求。
- Q6:在病毒載體生產中如何發揮作用?
A6: 在病毒載體生產如 AAV/AdV 病毒包裝后,能有效清除宿主 DNA,滿足 FDA/NMPA 對 HCD(宿主細胞 DNA)的嚴格管控要求,確保病毒載體的質量和安全性,對病毒載體的后續應用和審批等環節具有重要意義。
- Q7:在 mNGS 樣本處理中的優勢是什么?
A7: 能去除人體宿主 DNA,從而提升病原微生物檢測靈敏度,有助于更準確地檢測和分析樣本中的病原微生物,為疾病的診斷和治療提供更可靠的依據。
- Q8:在蛋白純化中的作用機制是怎樣的?
A8: 可清除 DNA 結合蛋白,提高目標蛋白純度,通過去除與蛋白結合的 DNA,減少雜質干擾,使目標蛋白更容易被純化和分離,提高蛋白純化的效率和質量。
- Q9:酶的等電點是多少?
A9: pI 為 9.6,這一特性使其容易跟絕大多數蛋白分離,方便在復雜的生物樣品中將酶與其他蛋白成分區分開來,有利于后續的純化和分析等工作。
- Q10:在不同溫度下的穩定性如何?
A10: 熱不穩定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)具有熱不穩定性,在 37℃環境下保溫 30 分鐘后活性會降至 10%,在 42℃環境下保溫 30 分鐘后活性會降至 1% 以下,這種熱不穩定性特點可在特定的溫度條件下方便地實現酶的滅活,為實驗流程的控制提供了便利。
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